荧光标记抗体技术是用荧光物标记抗体来检测细胞或组织中相应抗原或抗体的技术,荧光物种类一般有异硫氰酸荧光素(FITC)、罗丹明荧光素、二氯三嗪基氨基荧光素等,人们利用荧光标记的多肽来检测目标蛋白的活性,并将其发展的高通量活性筛选方法应用于疾病治疗靶点蛋白的药物筛选和药物开发,那么荧光标记抗体有哪些检测技术呢?今天小编在下面给大家做详细的解答。
1. 直接法
直接法是荧光抗体技术简单、基本的方法。它通过标记抗体直接与相应抗原结合,来鉴定未知抗原,这种方法具有特异性强,与其他抗原交叉染色体少,操作步骤少,方法简单;
2、间接法
间接法是目前常用的方法。先用已知未标记的抗体(第一抗体)与待检抗原反应或用未知抗体与已知抗原反应,反应一定时间后,洗去未结合的抗体,再与标记的抗免疫球蛋白抗体(二抗)反应。在第一步反应中,若抗原抗体发生了反应,则抗体被固定在标本上,那么第二步反应中标记的抗体(二抗)必然与第一步反应形成的抗原抗体复合物中的抗体发生反应,这样就可以通过二抗的示踪,对标本中未知抗原或抗体进行鉴定,这种方法既能鉴定未知抗原,又能鉴定未知抗体;
双标记法是用两种荧光素(常用FITC和PE)分别标记特异性不同的抗体,用于检测同一标本中的不同抗原。此法常用于细胞表面抗原和受体的研究。
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