重组蛋白是我们较为常用的一种蛋白表达方式,它能够通过基因重组技术,生产出我们所设计出来的蛋白产品,而蛋白表达的原理就是通过重组DNA或RNA,表达后获得我们所需的蛋白产品,重组蛋白表达,有哪些点是需要注意的呢?今天小编在下面给大家做详细的解答。
重组蛋白是一种基因重组后合成的人工蛋白,当我们知道蛋白的基因序列后,使用人工克隆该基因,并让其进入到质粒中,然后再把质粒传染给宿主细胞,这样,宿主细胞就成为了蛋白的表达工厂,然后,我们再将表达出来的蛋白质进行分离纯化,所得的蛋白质就是我们所需要的重组蛋白,诱导剂的浓度对蛋白的表达状态也是有影响的,低浓度诱导剂有利于可溶性蛋白的表达,较高的稳定可能增加了蛋白质合成的速度,表达的蛋白质易于包涵体的形式存在。一般在进行蛋白的大量表达之前会进行小量的测试诱导,确定最佳的活性和溶解性。
重组蛋白的获得途径主要分为体外表达和体内表达,两种方法比较类似,都是通过基因重组技术,获得包含表达基因片段的重组载体,而后将其转入可表达的宿主细胞体内,从而获得所需蛋白,而且,重组蛋白考虑利用转基因动物或植物进行生产,在生物制药上使用非常广泛。
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