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单克隆抗体是指来源单一的糖蛋白或者多肽抗原刺激下产生的抗体,具有高度的特异性和亲和力,单抗的最大优势是它的特异性、均一性、高效性和无限供应性。在免疫学、医学、生物学等领域的基础研究和临床医学上,包括对疾病(包括癌症)的诊断、预防和治疗等方面,均显示出巨大的生命力。


单克隆抗体


单克隆抗体制备的基本流程如下:

抗原制备
首先应该制备分离纯化的抗原,通常情况下也可以通过克隆抗原基因、合成抗原多肽或获取天然抗原等方式获得。

免疫小鼠
将分离纯化的抗原注射到小鼠体内,使其产生免疫应答并形成很多种抗体。

获取淋巴细胞
等到小鼠免疫后,在其淋巴组织中获取淋巴细胞。

杂交瘤细胞系列的建立
将免疫小鼠的淋巴细胞与骨髓瘤细胞结合,形成了杂交细胞。骨髓瘤细胞有着快速生长的特征,而免疫细胞则提供了极高的抗体产生能力。这个过程是根据化学制剂或钙离子刺激细胞融合,将杂交细胞筛选出来并培养形成了单种异源细胞系,也就是杂交瘤细胞系。

克隆化
将杂交瘤细胞系在内含制定浓度的筛选素(选择性浸润剂)的培养基内进行单克隆化,得到分离纯化单种抗体。

鉴定和分离纯化单克隆抗体
对获得的单克隆抗体进行检验,包括ELISA、wb、免疫组化等检测技术,确定其特异性和亲和力。

为了获得更高浓度更高纯度的单克隆抗体,也可以通过亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、逆向相色谱等方式进行分离纯化。

以上就是小编给大家介绍单克隆抗体制备的流程这块相关知识哦,强耀生物专注于多肽合成,蛋白表达,抗体制备等,从事于多肽行业多年,产品品质一流,欢迎大家前来咨询。

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