单克隆抗体是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来的细胞群所产生的,是一种高度特异性的抗体,可以用于诊断、治疗和研究等领域,那么单克隆抗体的制备流程有哪些呢?今天小编给大家做详细的解答。
1. 免疫原制备:首先需要准备纯化的免疫原,可以是蛋白质、多肽、糖、脂类等生物大分子或小分子。
2. 动物免疫:将纯化的免疫原注射到动物体内,激发其免疫系统产生抗体。一般常用小鼠、大鼠、兔子等动物作为免疫体。
3. 细胞融合:将免疫体中的 B 细胞与肿瘤细胞进行融合,形成杂交瘤细胞。此类细胞具有 B 细胞的抗体产生能力和肿瘤细胞的无限增殖能力。
4. 筛选和克隆:通过细胞培养和筛选,筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞,并进行单克隆化处理,即从单一细胞中分离出单一抗体。
5. 抗体纯化:将单克隆抗体进行纯化,去除杂质,得到高纯度的单克隆抗体。这些单克隆抗体可以广泛用于生物医学研究、诊断和治疗等领域。
6、鉴定单克隆抗体:通过酶联免疫吸附试验、免疫印迹、免疫荧光等方式,对单克隆抗体进行鉴定。