CN / EN
联系我们
一站式生物医药科研服务平台

融合蛋白分离纯化是一种用于分离和纯化融合蛋白的方法,融合蛋白是由两个或者多个不同蛋白质序列融合在一起构成的蛋白质,融合蛋白广泛应用于药物研究,疾病诊断,以及在医学和生物学技术领域的应用,那么融合蛋白分离纯化流程是怎样呢,今天小编在下面给大家做详细的解答。


融合蛋白表达


1. 表达融合蛋白:通过基因工程方法将目标蛋白的编码序列与表达载体连接,并转入宿主细胞(例如大肠杆菌)进行表达。


2. 细胞破碎:收获表达融合蛋白的细胞,通过裂解细胞膜(如超声波裂解、高压裂解等)释放融合蛋白。


3. 蛋白质提取:将细胞裂解液离心,收集上清液,获得蛋白质提取物。


4. 亲和层析:使用具有选择性结合融合蛋白的亲和层析树脂(如Nickel-NTA树脂、Glutathione Sepharose树脂等),可以将融合蛋白与非特异性蛋白质分离。


5. 洗脱蛋白:通过改变缓冲条件,如pH值、离子浓度等,将融合蛋白从亲和树脂上洗脱下来。


6. 纯化:洗脱的融合蛋白可以通过其他技术进一步纯化,如离子交换层析、凝胶过滤层析等。


7. 检验:通过SDS-PAGE、Western blot等方法检验纯化的融合蛋白的纯度和活性。

蛋白纯化的方法因蛋白质的性质及其结构域的选择而异,上述方法仅是一种常见的融合蛋白分离纯化的一般流程,具体的方法需根据实验设计和目标蛋白质的特性进行调整。

以上就是小编给大家介绍的融合蛋白分离纯化流程这块的相关知识哦,强耀生物专注于多肽合成、蛋白表达、抗体制备等,从事于多肽行业多年,产品品质一流,欢迎广大客户前来咨询。
置顶