大肠杆菌表达系统技术是利用大肠杆菌细胞内的转录和翻译机制来合成外源基因中的目标蛋白质，通常通过将目标基因插入到表达载体中，该载体包含适当的启动子和调控序列，用来控制目标蛋白质的表达水平。这是一种常见的蛋白质表达技术。那么大肠杆菌表达系统的组成有哪些呢？今天小编在下面给大家做详细的解答。
大肠杆菌表达系统的组成主要分为表达载体、外源基因、表达宿主菌三种：
一：表达载体：小型环状DNA，能自我复制。一个完整的质粒载体必须要有复制起点、启动子、插入的目的基因、筛选标记以及终止子；此外对大肠杆菌表达载体的要求是：①操纵子以及相应的的调控序列，外源基因产物可能会对大肠杆菌有毒害作用；②SD序列，即核糖体识别序列，一般SD序列与起始密码子之间间隔7-13bp翻译效率最高；③多克隆位点以便目的基因插入到适合位置。
二：外源基因：在大肠杆菌表达体系中要表达的基因即外源基因，包括原核基因和真核基因；原核基因可以在大肠杆菌中直接表达出来，但是真核基因韩有内含子不能，大肠杆菌不能对mRNA进行剪切，从而形成成熟的mRNA，所以真核基因一般以cDNA的形式在大肠杆菌表达系统中表达。此外还需提供大肠杆菌能识别的且能转录翻译真核基因的元件。
三：表达宿主菌：表达蛋白的生物体即大肠杆菌。表达宿主菌的选择在大肠杆菌蛋白表达过程中是很重要的因素——多数人会直接选择实验室曾经用过的宿主菌，而不去追究原因。对于宿主菌的选择主要根据宿主菌各自的特征及目的蛋白的特性，例如目的蛋白需要形成二硫键，可以选择Origami 2系列，Origami能显著提高细胞质中二硫键形成几率，促进蛋白可溶性及活性表达；目的蛋白含有较多稀有密码子可用Rosetta 2系列，补充大肠杆菌缺乏的七种(AUA，AGG，AGA，CUA，CCC，GGA及CGG)稀有密码子对应的tRNA，提高外源基因的表达水平。
大肠杆菌蛋白表达技术，被广泛应用于生物医药、农业和工业等领域，以上就是小编给大家介绍的大肠杆菌蛋白表达这块的相关知识哦，强耀生物专注于多肽合成、蛋白表达、抗体制备等，从事于多肽行业多年，产品品质一流，欢迎广大客户前来咨询。
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